El kit de prueba MDR-TB (Sanity 2.0) (abreviatura: Sanity MDR-TB) es un kit de prueba basado en cartuchos para detectar
mutaciones de resistencia a múltiples fármacos (incluidas mutaciones resistentes a rifampicina y mutaciones resistentes a isoniazida) en Mycobacterium tuberculosis (MTB) de muestras de esputo.Este kit está diseñado para ejecutarse en Sanity 2.0, que integra la extracción de ácido nucleico, la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (rt-PCR) y la interpretación de resultados en un instrumento totalmente automático (máquina todo en uno).

Principio

Sanity MDR-TB emplea sondas doblemente marcadas para apuntar al exceso de amplicones monocatenarios generados por PCR asimétrica;luego utiliza el análisis de la curva de fusión para generar la derivada negativa de la intensidad de fluorescencia versus la temperatura, y compara la temperatura de fusión (Tm) para obtener información sobre la mutación de las secuencias.Donde la coincidencia perfecta de la secuencia diana y la sonda proporciona la Tm más alta;La falta de coincidencia parcial, por ejemplo, mutación puntual, inserción o eliminación, causaría una Tm menor que la de la coincidencia perfecta.El grado disminuido está relacionado con el tipo de mutación puntual, el número de base de inserción o eliminación, así como con la ubicación de la mutación.Sanity MDR-TB cubre las mutaciones de rpoB (codones 507 ~ 533) para determinar la resistencia a la rifampicina;las mutaciones de la región promotora ahpC (posiciones -44~-30 y -15~4), promotor inhA
región (posiciones -17~-8), y codón katG 315, para determinar la resistencia a la isoniazida.

Marcado CE-IVD