O Kit de Identificação de Micobactérias (MMCA) (Abreviatura: Kit de Identificação de Micobactérias) é um reagente de diagnóstico in vitro usado para identificação de micobactérias a partir de amostras de cultura de micobactérias ou amostras de escarro.O kit emprega métodos de PCR e análise de curva de fusão multicolorida (MMCA) e tem como alvo a região do espaçador transcrito intergênico (ITS) entre os genes 16S rRNA e 23S rRNA para detectar eficientemente 51 micobactérias (tabela 1 do anexo), entre as quais, 19 micobactérias clinicamente relevantes pode ser identificado em nível de espécie, incluindo:

• Complexo M. tuberculose
• M. chelonae
• M. escrofulaceum
• M.bovis
• M. smegmatis
• M. abscesso
• M. kansasii
• M. gordonae
• M. lentiflavum
• M. simiae
• M. não cromogênico
• M. terrae
• M. marinum/M.ulceranos
• M. fortuitum
• M. avium
• M. intracelular
• M. xenopi
• M. malmoense
• M. szulgai

Princípio

O kit de identificação de micobactérias emprega sondas duplamente marcadas para atingir o excesso de amplicons de fita simples gerados por PCR assimétrica;em seguida, usa a análise da curva de fusão para gerar a derivada negativa da intensidade de fluorescência versus temperatura e de acordo com a temperatura de fusão específica (Tm) para obter as informações da sequência.No caso da presença de um alvo específico, surgirá um pico de fusão numa posição correspondente e o valor de Tm associar-se-á a uma micobactéria específica.Além disso, um fragmento do gene simportador de sacarose-próton 2 (SUC2) de Arabidopsis thaliana foi incluído como controle positivo interno (IPC) para indicação de inibição da PCR.

Marcação CE-IVD