ชุด Mycobacteria Identification Kit (MMCA) (ตัวย่อ: Mycobacteria Identification Kit) เป็นรีเอเจนต์เพื่อการวินิจฉัยภายนอกร่างกายที่ใช้สำหรับการจำแนกมัยโคแบคทีเรียจากตัวอย่างมัยโคแบคทีเรียที่เพาะเลี้ยงหรือตัวอย่างเสมหะชุดทดสอบนี้ใช้วิธีการวิเคราะห์ PCR และ multicolor Melting Curve Analysis (MMCA) และกำหนดเป้าหมายไปที่บริเวณ Intergenic Transcribed Spacer (ITS) ระหว่างยีน 16S rRNA และ 23S rRNA เพื่อตรวจหาเชื้อมัยโคแบคทีเรีย 51 ตัวได้อย่างมีประสิทธิภาพ (ตารางภาคผนวก 1) ในจำนวนนี้มีเชื้อมัยโคแบคทีเรียที่เกี่ยวข้องทางคลินิก 19 ตัว สามารถระบุได้ถึงระดับชนิด ได้แก่ :

• เอ็มวัณโรคซับซ้อน
• เอ็ม.เชโลเน่
• M. scrofulaceum
• เอ็ม โบวิส
• เอ็ม. สเมกมาติส
• ม. ฝี
• ม. แคนซัส
• เอ็ม. กอร์โดเน่
• M. lentiflavum
• ม.สิมิเอ
• M. nonchromogenicum
• เอ็ม เทอร์รา
• เอ็ม มารินัม/เอ็มแผลพุพอง
• ม. fortuitum
• เอ็ม.เอเวียม
• ม. ภายในเซลล์
• เอ็ม. ซีโนปี
• เอ็ม. มัลโมเอนเซ่
• เอ็ม. ซซูลไก

หลักการ

ชุดระบุเชื้อมัยโคแบคทีเรียใช้โพรบที่มีป้ายกำกับคู่เพื่อกำหนดเป้าหมายแอมพลิคอนแบบเกลียวเดี่ยวส่วนเกินที่สร้างโดย PCR แบบอสมมาตรจากนั้นใช้การวิเคราะห์เส้นโค้งการหลอมเหลวเพื่อสร้างอนุพันธ์ลบของความเข้มของฟลูออเรสเซนซ์เทียบกับอุณหภูมิ และตามอุณหภูมิหลอมเหลวจำเพาะ (Tm) เพื่อให้ได้ข้อมูลของลำดับในกรณีที่มีเป้าหมายเฉพาะ จุดสูงสุดของการหลอมเหลวจะเกิดขึ้นที่ตำแหน่งที่สอดคล้องกัน และค่า Tm จะเชื่อมโยงกับมัยโคแบคทีเรียชนิดใดชนิดหนึ่งนอกจากนี้ ส่วนของยีน Arabidopsis thaliana sucrose-proton symporter 2 (SUC2) ยังถูกรวมไว้เป็นตัวควบคุมเชิงบวกภายใน (IPC) เพื่อบ่งชี้การยับยั้ง PCR

เครื่องหมาย CE-IVD